Informes de practicas de laboratorio: Extraccion de ADN de la saliva humana

Resumen de la practica

La secreción salival del hombre varía entre 1 y 1,5 litros diarios. Tiene una función lubricante y facilitadora de la masticación y la deglución; asimismo posee una función enzimática desdoblando los glúcidos (amilasa). Durante la noche casi deja de segregarse. La saliva en sí, no es un fluido que contenga componente celular y por ello carece por sí misma de ADN; pero se encuentra en un medio lleno de células epiteliales (epitelio bucal). Estas células se desprenden continuamente y llegan a formar parte de la saliva; El ADN se encuentra en el interior del núcleo de todas las células, disperso y muy replegado, unido a proteínas para formar la cromatina. Por lo tanto, podremos extraerlo a partir de prácticamente cualquier material de origen biológico, en primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al núcleo de la célula. Después debe romperse igual la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por último hay que proteger el ADN de enzimas que puedan disminuirlo y para aislarlo hay que hacer que se precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa. La sal evita la unión de las proteínas al ADN.

Abstract

Man salivary secretion varies between 1 and 1.5 liters per day. It has a lubricant and facilitative role of chewing and swallowing; It also has an enzymatic function unfolding carbohydrates (amylase). Almost overnight stop segregating. Saliva itself is not a fluid containing cellular component and therefore lacks DNA itself; but it is in a place full of epithelial cells (oral epithelium) average. These cells are continually shed and become part of saliva; DNA is found in the nucleus of all cells, dispersed and very refolding protein bound to form chromatin. Therefore, we can remove it from virtually any material of biological origin, first have to break the cell wall and the plasma membrane to enter the cell nucleus. It must be broken just after the nuclear membrane to release the DNA. Finally we must protect DNA from enzymes that can decrease and to isolate it to do you rush in alcohol. DNA is water soluble, but when it is unrolled and alcohol precipitates is the interface between alcohol and water. In addition to allowing us to see the DNA, alcohol separates DNA from other cellular components, which are left in the aqueous solution. The salt prevents binding of proteins to DNA.

Materiales

Metodología

Se agregaron 25ml de agua en un vaso precipitado, luego de esto agregamos un poco de saliva (aproximadamente de 2 a 5ml), ya con esto mezclamos un poco y luego adicionamos 10g de sal y seguimos agitando nuestra mezcla, agregamos 5ml de detergente y continuamos mezclando, luego de esto, adicionamos nuestra encima, que en este caso es el jugo de piña; por ultimo adicionamos un poco más de agua destilado (aproximadamente unos 10ml) para poder observar mejor nuestro ácido desoxirribonucleico y para finalizar agregamos 25ml de alcohol para que el ADN llegue a la parte superior de nuestro vaso precipitado y así poder tomarlo y llevarlo hasta un microscopio para poder observarlo de manera más detallada.

Análisis, datos y resultados

¿Por qué se usa detergente en este experimento?

El detergente utilizado en el experimento tiene como función, destruir las membranas celulares del tejido vivo que estamos utilizando; el detergente disuelve las grasas, siendo el componente principal de la membrana plasmática y nuclear de las células; al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior.

Fuente: http://learn.genetics.utah.edu/es/extraction/detergent.cshtml

¿Que función cumplen las enzimas (jugo de piña) en la extracción del ADN?

Esta enzima contribuye en el procedimiento de eliminar las proteínas que puedan contaminar el ADN, permitiéndonos observarlo mejor.

Realizar un glosario

· Enlaces fosfodiéster: es un enlace covalente que se produce entre un grupo fosfato (H₃PO₄) y un grupo hidroxilo (–OH). Este tipo de enlace lo podemos encontrar en fosfolípidos que forman la membrana celular, y en nucleótidos, que forman los ácidos nucleicos ARN y ADN.

· Polinucleótidos: es una molécula orgánica del polímero abarcada de los monómeros del nucleótido covalente enlazados en una cadena. El ADN y el ARN son ejemplos de polinucleótidos con la función biológica específica.

· Enzimas: son proteínas complejas que producen un cambio químico específico en todas las partes del cuerpo. Por ejemplo, pueden ayudar a descomponer los alimentos que consumimos para que el cuerpo los pueda usar. La coagulación de la sangre es otro ejemplo del trabajo de las enzimas.

· Proteínas: son macromoléculas compuestas por carbono, hidrógeno, oxígeno y nitrógeno. La mayoría también contienen azufre y fósforo. Las mismas están formadas por la unión de varios aminoácidos, unidos mediante enlaces peptídicos. El orden y disposición de los aminoácidos en una proteína depende del código genético, ADN, de la persona.

Aminoácidos: son la base de todo proceso vital ya que son absolutamente necesarios en todos los procesos metabólicos. Sus funciones más importantes son el transporte óptimo de nutrientes y la optimización del almacenamiento de todos los nutrientes.

En este laboratorio pudimos analizar que al agregar sal en esta disolución actúa disminuyendo la solubilidad de las proteínas, haciendo que precipite y se separe más fácilmente del ADN.

Con el detergente utilizado en el experimento pudimos considerar que su función es destruir las membranas celulares del tejido vivo que estamos utilizando, porque al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior.

El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse. De ahí la facilidad para retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se precipita en la interface entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución acuosa.

Con las enzimas pudimos romper y separar del ADN, que es el material que encontramos. El jugo de piña provoca la ruptura de múltiples enlaces en las proteínas ya que contiene papaína.